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产品名称:伊文思蓝染液1%(evans blue)
英文名称:
产品编号:MBR017 产品包装:5ml 产品价格:50

产品描述:

 伊文思蓝(Evans Blue),也称作埃文斯蓝,是一种非膜渗透性的染料。当质膜受损,染料能进入细胞质和细胞核,从而将其染成蓝色,可用来检测细胞活力。伊文思蓝还能用来研究血脑屏障(BBB)渗透性,通过与白蛋白结合从而指示血脑屏障穿透蛋白能力。

  1%的伊文思蓝染色液,使用方便,直接加入样本染色即可。

 

保存

保存:室温避光保存,1年有效。

 

使用方法

一、血脑屏障通透性

1.1    取处理后的动物(以小鼠为例),静脉注射伊文思蓝染色液(0.5%),使得小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5~1h 后处死小鼠,取出目的脑组织。

【注意】:伊文思蓝染色液的注射用量需要根据动物类型以及体重来决定。

1.2    将脑组织置于 1.5ml 离心管中,加入 1ml PBS,迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆,4℃离心。

1.3    取上清,加入等量三氯乙酸,4℃孵育。该步骤亦可采用如下操作:取上清,按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮,室温孵育24h。

1.4    4℃离心15min。

1.5    取上述溶液,用分光光度计测 620 nm下的OD值。同时测定已知不同梯度的标准伊文思蓝的OD值,绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测样品的伊文思蓝含量。

 

二、细胞活力鉴定

2.1 取 100μl 重悬细胞到常规离心管内,加入100μl 伊文思蓝染色液(0.5%)轻轻混匀(染色时间可适当延长,但不宜超过 10min)。

2.2吸取少量经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%

 

注意事项

1)  伊文思蓝对人体有轻微毒性,操作过程中请注意防护。

2)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

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