产品名称:组织疫荧光染色试剂盒-小鼠源(双染) | ||
英文名称: | ||
产品编号:MBR066 | 产品包装:30T-50T | 产品价格:770 |
产品描述:
产品货号:MBR066
产品包装:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
保存温度 |
DW3092-A |
通透试剂 |
100ml |
-20度 |
DW3092-B |
封闭液 |
6ml |
-20度 |
DW3092-C |
二抗染色液 |
100ul |
-20度 |
DW3092-D |
抗体稀释液(一抗 二抗) |
10ml |
-20度 |
DW3092-E |
细胞核染色液 |
5ml |
-20度 |
DW3092-F |
抗荧光淬灭封片液 |
5ml |
-20度 |
DW3092-G |
PBS粉 |
1L |
常温 |
DW3092-H |
盖玻片 |
24*50 |
常温 |
自备试剂及耗材:
吸头/吸水纸/一抗/离心管/湿盒/细胞固定液
一抗要求:抗体来源分别为兔(rabbit)源和大鼠(rat)源
实验步骤:
1、 PBS配制: 取出G号试剂,加入1L双蒸水,溶解即可,后面实验清洗均匀这个试剂,后面步骤均用G代替。
2、 取出切好的片子,是切片按照石蜡切片步骤,做到抗原修复步骤;冰冻切片,用4%的多聚甲醛固定30分钟,G液洗3次,每次5分钟。
3、 加1ml A液,室温放置10分钟后,去掉液体,用G液洗2-3次。
4、 滴1-2滴B液,室温孵育30分钟。注意:液体的量要覆盖细胞。
5、 用吸水纸吸掉B液,加入自己准备的一抗混合液,4度过夜;一抗可用D液稀释。此步骤加的液体一定要全覆盖标本。
6、 用G液洗标本3次,每次浸泡3-5分钟。
7、 准备1个离心管,取2ul C液加入到100ul D液中混匀,该剂量为2-4张8mm爬片的量,请自己根据标本的数量和大小自动调整,用量即为液体覆盖到标本即可。
8、 用吸水纸吸掉第6步清洗后的液体;注意:每次吸液体,吸水纸只能在细胞边缘。
9、 加20-50ul第7步配制的液体,室温孵育60分钟。用量自己可以调整,液体覆盖到标本即可。
10、 用G液洗3次,每次3-5分钟。
11、 用吸水纸吸干水,加入2-3滴E液,染色5分钟。
12、 用G液洗3次,每次3-5分钟。
13、 吸水纸吸干多余的液体,加2-3滴F液体。用盖玻片封片。
14、 及时拍照,如果不能拍照,建议放4度冰箱。
所用荧光激发和接收波长:
1. DyLight 488是一种绿色荧光团,其最大吸收波长在493nm,相应的最大发射波长是518nm。
2. DyLight 549是一种黄红色荧光团(显微镜下红色),其最大吸收波长在555nm,相应的最大发射波长是568nm。
3. E为细胞核染料,是一种蓝色,其最大吸收波长在358nm,相应的最大发射波长是461nm。
染色结果:
绿色为兔源抗体染色指标;红色为大鼠源抗体染色指标;蓝色为细胞核。
注意事项:
1、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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