重庆蒙柏欧生物科技有限公司

产品描述：

产品货号：MBR074

产品包装：

自备试剂及耗材：

吸头/吸水纸/一抗/离心管/湿盒/细胞固定液

一抗要求：抗体来源分别为兔（rabbit）源、小鼠（mouse）源和山羊（goat）源

检测手段：

激光共聚焦显微镜

实验步骤：

1、 PBS配制：取出G号试剂，加入1L双蒸水，溶解即可，后面实验清洗均匀这个试剂，后面步骤均用G代替。

2、取出切好的片子，是切片按照石蜡切片步骤，做到抗原修复步骤；冰冻切片，用4%的多聚甲醛固定30分钟，G液洗3次，每次5分钟。

3、加1ml A液，室温置放10分钟，后去掉液体，用G液洗2-3次。

4、滴1-2滴B液，室温孵育30分钟。注意：液体的量要覆盖细胞。

5、用吸水纸吸掉B液，加入自己准备的一抗混合液，4度过夜；一抗可用D液稀释。此步骤加的液体一定要全覆盖标本。

6、用G液洗标本3次，每次浸泡3-5分钟。

7、准备1个离心管，取2ul C液加入到100ul D液中混匀，该剂量为2-4张8mm爬片的量，请自己根据标本的数量和大小自动调整，用量即为液体覆盖到标本即可。

8、用吸水纸吸掉第6步清洗后的液体；注意：每次吸液体，吸水纸只能在细胞边缘。

9、加20-50ul第7步配制的液体，室温孵育60分钟。用量自己可以调整，液体覆盖到标本即可。

10、用G液洗3次，每次3-5分钟。

11、用吸水纸吸多余的液体，加入2-3滴E液，染色5分钟。

12、用G液洗3次，每次3-5分钟。

13、吸水纸吸干多余的液体，加2-3滴F液体。用盖玻片封片。

14、及时拍照，如果不能拍照，建议放4度冰箱。

所用荧光激发和接收波长：

1. DyLight 488是一种绿色荧光团，其最大吸收波长在493nm，相应的最大发射波长是518nm。

2. Alexa Fluor 647是一种远红外色荧光团，其最大吸收波长在651nm，相应的最大发射波长是667nm。

3. Dylight 594是一种橙红色荧光团（显微镜为红色），其最大吸收波长在593nm，相应的最大发射波长是618nm。

4. E为细胞核染料，是一种蓝色，其最大吸收波长在358nm，相应的最大发射波长是461nm。

染色结果：

橙红（橙色）为小鼠（Mouse）源抗体染色指标；远红外色为兔（Rabbit）源抗体染色指标；绿色山羊（Goat）源抗体指标；细胞核为蓝色。

注意事项：

1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。