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产品名称:组织疫荧光染色试剂盒-小鼠源(三染)
英文名称:
产品编号:MBR075 产品包装:30T-50T 产品价格:2000

产品描述:

组织免疫荧光染色试剂盒-小鼠源三染(快速)

产品货号:MBR075

产品包装:

产品编号

产品名称

包装

保存温度

A

通透试剂

100ml

-20度

B

封闭液

6ml

-20度

C

二抗染色液

200ul

-20度

D

抗体稀释液(一抗 二抗)

10ml

-20度

E

 细胞核染色液

5ml

-20度

F

抗荧光淬灭封片液

5ml

-20度

G

PBS粉

1L

常温

H

盖玻片

24*50

常温

 

 

自备试剂及耗材:

吸头/吸水纸/一抗/离心管/湿盒/细胞固定液

一抗要求:抗体来源分别为兔(rabbit)源/大鼠(rat)源和山羊(goat)源

检测手段:

激光共聚焦显微镜

实验步骤:

1、 PBS配制: 取出G号试剂,加入1L双蒸水,溶解即可,后面实验清洗均匀这个试剂,后面步骤均用G代替。

2、 取出切好的片子,是切片按照石蜡切片步骤,做到抗原修复步骤;冰冻切片,用4%的多聚甲醛固定30分钟,G液洗3次,每次5分钟。

3、 加1ml A液,室温置放10分钟,去除掉液体,用G液洗2-3次。

4、 滴加1-2滴B液,室温孵育30分钟。注意:液体的量要覆盖细胞。

5、 用吸水纸吸掉B液,加入自己准备的一抗混合液,4度过夜;一抗可用D液稀释。此步骤加的液体一定要全覆盖标本。

6、 用G液洗标本3次,每次浸泡3-5分钟。

 

 

7、 准备1个离心管,取2ul C液加入到100ul D液中混匀,该剂量为2-4张8mm爬片的量,请自己根据标本的数量和大小自动调整,用量即为液体覆盖到标本即可。

8、 用吸水纸吸掉第6步清洗后的液体;注意:每次吸液体,吸水纸只能在细胞边缘。

9、 加20-50ul第7步配制的液体,室温孵育60分钟。用量自己可以调整,液体覆盖到标本即可。

10、 用G液洗3次,每次3-5分钟。

11、 用吸水纸吸干多余的液体,加入2-3滴E液,染色5分钟。

12、 用G液洗3次,每次3-5分钟。

13、 吸水纸吸干多余的液体,加2-3滴F液体。用盖玻片封片。

14、 及时拍照,如果不能拍照,建议放4度冰箱。

 

所用荧光激发和接收波长:

 

1.    DyLight 488是一种绿色荧光团,其最大吸收波长在493nm,相应的最大发射波长是518nm。

2.    Alexa Fluor 647是一种远红外色荧光团,其最大吸收波长在651nm,相应的最大发射波长是667nm。

3.    Dylight 594是一种橙红色荧光团(显微镜为红色),其最大吸收波长在593nm,相应的最大发射波长是618nm。

4    E为细胞核染料,是一种蓝色,其最大吸收波长在358nm,相应的最大发射波长是461nm。

 

染色结果:

橙红(橙色)为大鼠(Rat)源抗体染色指标;远红外色为兔(Rabbit)源抗体染色指标;绿色山羊(Goat)源抗体指标;细胞核为蓝色。

注意事项:

1、  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

2、  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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