产品名称:Hoechst 33342 染液(1 mg/mL) | ||
英文名称: | ||
产品编号:MBR076 | 产品包装:1mL | 产品价格:250 |
产品描述:
Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
本系列产品均以溶液形式提供,其中Hoechst 33342染液(1 mg/mL)为特定浓度的产品,其浓度为1 mg/mL。用于细胞核染色时,推荐工作浓度为0.5-10 μg/mL。如需使用粉末状该产品,可选购Hoechst 33342。
产品性质
中文名称(Chinese Synonym) |
二苯甲亚胺, 三氯化氢 2'-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑 |
英文名称(English Synonym) |
2’-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride |
分子式(Molecular Formula) |
C27H28N6O·3HCl |
分子量(Molecular Weight) |
561.93 |
CAS号(CAS NO.) |
23491-52-3 |
荧光光谱(Fluorescence Spectral) |
Hoechst 33342的Ex/Em=346/460; Hoechst33342-核酸的Ex/Em=350/461. 荧光可用氙气灯,泵弧灯或者UV激光激发;可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。 |
纯度(Purity) |
≥95%(HPLC) |
结构(Structure) |
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运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。
4℃避光保存,1 mg/mL的Hoechst 33342储存液,有效期1年。
注意事项
1)Hoechst 33342 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 将1 mg/mL的Hoechst 33342用PBS或合适的缓冲液制备成10~50 µM Hoechst33342染色液。
2. 固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
b)吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色:
a)细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。
b)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
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