产品名称:尼氏染色液(甲苯胺蓝法) | ||
英文名称: | ||
产品编号:MBR132 | 产品包装:500mL | 产品价格:640 |
产品描述:
尼氏染色液是以德国的精神病学家和神经病理学家Franz Nissl的名字命名的,主要用于石蜡或冰冻切片神经元细胞浆中的尼氏小体(Nissl body)染色。染色后呈蓝紫色,用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl小体大而数量多,说明神经细胞合成蛋白质的功能较强;相反,在神经细胞受到损伤时,Nissl小体的数量会减少甚至消失。尼氏染色液的有效成分是Cresyl violet,该成分可以和RNA或DNA结合,也可以对粗面内质网上的核糖体以及细胞核染色。
运输与保存方法
室温运输。室温避光保存,至少1年有效。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)Nissl染色液的染色能力很强,并且染色后很难去除,请注意勿使染色液沾染皮肤和衣物等。
3)需自备4%多聚甲醛、无水乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇及二甲苯。
4)样品数量较多时,可以用染色架和染色缸,便于操作。第一次使用本产品时建议先取1-2个样品进行预实验。
使用方法
一. 样本处理:
1)对于石蜡切片:
①二甲苯中脱蜡5-10 min,共三次。注:脱蜡不充分会导致染色不均匀;
②无水乙醇5 min;
③90%乙醇2 min;
④70%乙醇2 min;
⑤蒸馏水2 min。
2)对于冰冻切片:
①用4%多聚甲醛固定10 min以上。
②蒸馏水洗涤2 min。
③换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2 min。
3)对于培养细胞:
①用4%多聚甲醛固定10 min以上;
②蒸馏水洗涤2 min;
③换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2 min。
二. 染色步骤:
1)对上述处理好的样品,用尼氏染色液染色3-10 min (可以根据染色结果和要求调整时间,染色时温度提高到37-50 ℃对于25-50 μm等较厚的切片可以使染色更均匀)。
2)蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可)。
3)95%乙醇洗涤约5 Sec。此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明及封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
【注】:如果用于免疫组化等染色后的复染,可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行尼氏染色。
三. 脱水、透明、封片或进行其它染色
1) 脱水、透明、封片:
①95%乙醇脱水2 min;
②换用新鲜的95%乙醇再脱水2 min。
③二甲苯透明5 min。
④换用新鲜的二甲苯,再透明5 min。
⑤用中性树胶或其它封片剂封片。
⑥显微镜下观察,细胞呈现斑驳的蓝紫色染色。
2) 进行其它染色:
如果进行免疫荧光染色,或进行Hoechst等荧光染料的染色,在尼式染色液染色后:
①70%乙醇洗涤2次,每次2 min。
②PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5 min。
③即可进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
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