产品名称:IPTG溶液 | ||
英文名称: | ||
产品编号:MBQ1022 | 产品包装:50mg/ml 5ml | 产品价格:180 |
产品描述:
产品货号 |
产品名称 |
包装 |
MBQ1022 |
IPTG溶液 |
5ml |
产品介绍:
IPTG为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。IPTG也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。此产品为IPTG用双蒸水溶解过滤后配成的无菌溶液,浓度为50mg/mL。
保存说明:
-20℃避光保存储存,有效期至少12个月。
使用说明:
蛋白表达诱导:
50mg/mL浓度为210mM。如果终浓度要求为0.5mM,则每升培养基中加入2.38mLIPTG溶液(50mg/mL)。如果实验中需要使用其他诱导浓度,可自行计算加入量。
蓝白斑筛选:
a. 在100mL的琼脂培养基中,加入500μL的X-gal溶液(20mg/mL)、250μL的IPTG溶液(50mg/mL)和100μL的Amp(氨苄青霉素,100mg/mL),制作成含X-Gal、IPTG和Amp平板培养基。
b. 实际上X-gal和IPTG可以直接涂抹在平板培养基表面,90mm的平板,X-gal(20mg/mL)涂40μL,IPTG(50mg/mL)涂16μL。150mm的平板加倍使用量,待涂布的液体干后就可以使用。
c. 细菌铺板后,37℃培养过夜,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有DNA插入片段的基因重组体)
注意事项:
1. 高压灭菌后的培养基需冷却至55℃以下时加入X-Gal、IPTG和Amp,以防失活。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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