产品描述：

免疫磁珠分离技术是以高均一性的磁性微球为固相支持物，将免疫配基通过功能基团结合到磁性载体上形成的免疫磁性微球，利用免疫学反应的高度特异性与磁珠特有的磁响应性，实现特异性靶物质分离的技术，具有特异性强、灵敏度高、效率高、操作简单等特点。

应用羊抗鼠（Goat anti-Mouse）IgG免疫磁珠可根据实验需要选择各种小鼠单抗实现细胞分离。通常使用以下两种分离方式：阳性分离或阴性分离。阳性分离是直接从细胞混合液中分离靶细胞，阴性分离是利用免疫磁珠去除无关细胞，收集游离于磁场中的靶细胞。

羊抗鼠（Goat anti-Mouse）IgG免疫磁珠可通过直接法或间接法实现细胞分选。直接法是将抗特异细胞表面抗原的Mouse IgG与免疫磁珠表面的羊抗鼠IgG结合，将磁珠结合的细胞与其它细胞分开，达到细胞分选的目的。间接法是先将抗特异细胞表面抗原的Mouse IgG与混合体系中靶细胞表面特异抗原结合，再与羊抗鼠（Goat anti-Mouse）IgG免疫磁珠结合达到细胞分选的目的。

 

 

常规操作方式，建议根据具体实验，优化实验方法。
1）从抗凝血中提取外周血单个核细胞（PBMC），用PBS，5% BSA，0.09% NaN3，pH7.4洗3次，40-70 µm尼龙网过滤去除细胞团块和碎片，调整细胞数为1×108 /mL。

2）加入适量Mouse IgG，一般1×107 PBMC中加入0.1-20 µg抗体，室温反应30 min。

3）1000 rpm离心5 min，弃上清。加入1 mL磁珠分选缓冲液重悬细胞，1000 rpm离心5 min，弃上清，洗2次（2×1 mL）。
4）1 mL磁珠分选缓冲液重悬细胞，加入50 µL免疫磁珠，室温反应30 min，间隔10 min轻晃反应管，避免磁珠沉淀，使磁珠与细胞充分反应，尽量防止出现气泡。阴性分选采用步骤5-7，阳性分选采用步骤8-9。

阴性分选步骤

5）应用磁分离器分离5-8 min，收集未被免疫磁珠结合的细胞悬液至另一干净管中。

6）加入1 mL磁珠分选缓冲液重悬磁珠，用玻璃滴管或移液枪枪头反复吹打磁珠。

7）重复步骤5，合并两次收集的细胞悬液，可将细胞悬液再次置于磁分离器中分离5-8 min，可明显增加靶细胞纯度。

阳性分选步骤

 

8）应用磁分离器分离5-8 min，去除未与磁珠结合的细胞。
9）结合了靶细胞的免疫磁珠用1 mL磁珠分选缓冲液洗5次（5×1 mL）后，可直接进行流式检测，或置于37℃培养48 hrs可使细胞与磁珠分离。