产品描述：

RIPA裂解液

 

产品货号	产品名称	包装
MBW004	RIPA裂解液	100ml

 

产品介绍：

        RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞、组织快速裂解液。RIPA 裂解液裂解后的蛋白样品可以用于常规的 Western、免疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。

        RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。

        本产品为强效裂解液，主要成分为50mM Tris (pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。

 

保存说明：

-20℃保存。

 

使用说明：

1.  对于组织样品：

a. 组织块用冷 PBS 洗涤，去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

b. 加入 适量裂解液（使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂，最终浓度为1mM）冰上彻底匀浆。(如果裂解不充

分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)

c. 将匀浆液转移至 1.5ml 离心管中，振荡。冰浴 30min，期间用移液器反复吹打，确保细胞完全裂解。

d. 12000g 离心 5min，收集上清，即为总蛋白溶液。

2. 对于培养细胞样品：

(1) 对于贴壁细胞：

a. 去除培养液，用 PBS 冲洗细胞 2-3 次。最后一次彻底吸干残留液。

b. 按照6孔板每孔加入150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。期间反复晃动培养板，使试剂与细胞充分接

触。

c. 用细胞刮刀将细胞及试剂刮下，收集到 1.5ml 离心管中。

(2) 对于悬浮细胞：

a. 离心收集细胞，每 6 孔板细胞加约150-250 ul 裂解液（在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂），振荡。

b. 冰浴 30min，期间每 10 分钟用 200ul 移液器反复吹打数次，确保细胞完全裂解。

c. 12000g 离心 5min，收集上清，即为总蛋白。

 

注意事项：

1. 本产品宜分装后使用，切忌多次反复冻融。

2. 对于组织样品：

每20毫克组织加入150-250微升裂解液。对于软骨、皮肤等组织，可适当减少试剂用量，以提高蛋白浓度。

3. 对于培养细胞样品：

通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到

200微升或250微升。

裂解时可能会出现较粘稠状。可用移液器反复吹打，直至呈液状为止。如果一直较稠，可再加入适量裂解液。

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

文献：

1、Premature Ovarian Insufficiency (POI) Induced by DynamicIntensity Modulated Radiation Therapy via P13K-AKT-FOXO3a in Rat Models    Biomed Res Int. 2021 Jun 29;2021:7273846. doi: 10.1155/2021/7273846.    IF：3.246