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产品名称:BCA蛋白浓度测定试剂盒
英文名称:
产品编号:MBW109 产品包装:200T 产品价格:150

产品描述:

产品编号

产品名称

包装

A

BCA试剂A

40ml

B

BCA试剂B

1.2ml

C

蛋白标准(BSA)

20mg

D

蛋白标准配置液

1ml

 

说明书

 

 

保存条件:

        室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20ºC冻存。

 

使用说明:
1. 蛋白标准液的配置

a. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用,也可以-20ºC长期保存。

b. 取适量25mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白标准,加入980µl稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9% NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20ºC长期保存。

2. BCA工作液的配置

      根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。例如5ml BCA试剂A加100µlBCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。

3. 蛋白浓度检测

按照下表制备标准曲线和待测蛋白:

管号

1

2

3

4

5

6

7

8

样品1

样品2

...

标准蛋白溶液(μl)

0

1

2

4

8

12

16

20

适当体积

适当体积

适当体积

蒸馏水(μl)

20

19

18

16

12

8

4

0

补足到20µl

补足到20µl

补足到20µl

BCA工作液(μl)

200

200

200

200

200

200

200

200

200

200

200

蛋白质浓度(mg/ml)

0

0.025

0.05

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

待测

待测

待测

a. 37ºC放置20-30分钟。

: 也可以室温放置2小时,或60ºC放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。

b.  用酶标仪测定A562,或540-595nm之间的波长的吸光度。

c. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。

 

注意事项:

 

1. 长期不用时,Cu 试剂与 PBS 稀释液可置于 2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA 试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可 37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。

2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。

3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

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