产品名称:BCA蛋白浓度测定试剂盒 | ||
英文名称: | ||
产品编号:MBW109 | 产品包装:200T | 产品价格:150 |
产品描述:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
A |
BCA试剂A |
40ml |
B |
BCA试剂B |
1.2ml |
C |
蛋白标准(BSA) |
20mg |
D |
蛋白标准配置液 |
1ml |
|
说明书 |
|
保存条件:
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20ºC冻存。
使用说明:
1. 蛋白标准液的配置:
a. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用,也可以-20ºC长期保存。
b. 取适量25mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白标准,加入980µl稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9% NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20ºC长期保存。
2. BCA工作液的配置:
根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。例如5ml BCA试剂A加100µlBCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。
3. 蛋白浓度检测
按照下表制备标准曲线和待测蛋白:
管号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
样品1 |
样品2 |
... |
标准蛋白溶液(μl) |
0 |
1 |
2 |
4 |
8 |
12 |
16 |
20 |
适当体积 |
适当体积 |
适当体积 |
蒸馏水(μl) |
20 |
19 |
18 |
16 |
12 |
8 |
4 |
0 |
补足到20µl |
补足到20µl |
补足到20µl |
BCA工作液(μl) |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
蛋白质浓度(mg/ml) |
0 |
0.025 |
0.05 |
0.1 |
0.2 |
0.3 |
0.4 |
0.5 |
待测 |
待测 |
待测 |
a. 37ºC放置20-30分钟。
注: 也可以室温放置2小时,或60ºC放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
b. 用酶标仪测定A562,或540-595nm之间的波长的吸光度。
c. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。
注意事项:
1. 长期不用时,Cu 试剂与 PBS 稀释液可置于 2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA 试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可 37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。
2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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