产品名称:Delivector 小分子化合物转染试剂 | ||
英文名称: | ||
产品编号:MBX006 | 产品包装:0.5ml | 产品价格:250 |
产品描述:
产品货号 |
产品名称 |
包装 |
MBX006 |
Delivector小分子化合物转染试剂 |
500ul |
产品介绍:
Delivector是一款优秀、低成本、值得信赖的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中,可在大的生产容器内(从96孔板到100L生物反应器)提供连续性的高基因表达。
本品是Delivector的无菌溶液,浓度为1mg/ml,可直接使用。按照小分子化合物:Delivector=1:3的比例来操作,1ml本品足以用来转染330μg小分子化合物。
保存说明:
-20℃保存,有效期1年
使用说明:(贴壁细胞)
1. 铺板:
转染前18-24h进行铺板,调整合适的细胞密度(参考表1),使其在转染时细胞密度达60-80%。
2. 转染:(以6孔板为例)
a. 转染前1-2h,每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基。
b. 制备Delivector-小分子化合物转染复合物(请严格按照以下步骤进行):
①往300μl无血清培养基加入2μg质粒小分子化合物,混匀。
②在混合物内加入6μl Delivector(1mg/ml)(小分子化合物/Delivector=1:3),混匀。
③无菌环境,室温静置30min以形成Delivector-小分子化合物转染复合物。
④用移液枪上下吹打3次,轻轻混匀。
c. 将Delivector-小分子化合物转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋,使复合物分散均匀。
3. 孵育:
a. 37℃,5% CO2培养箱内培养细胞,转染12-18h,去除含Delivector-小分子化合物复合物的培养液,更换新鲜的培养基。
b. 通常,转染36-48h后能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。
注意事项:
1. 收到本品或第一次使用前,请根据单次用量分装后置于-20℃冻存,尽量减少反复冻融次数。
2. 本品为无菌溶液,请严格按照无菌操作进行。
3. 请使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定小分子化合物浓度,260nm / 280nm比值确定小分子化合物纯度(比值应该在1.8~2.0的范围之内)。如有条件,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。
4. 请使用保存适当和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。细胞如果是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。
5. 对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。
6. 对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。
7. 推荐用商业化的无血清培养基比如Opti-MEM I来稀释小分子化合物和Delivector,制备转染复合物。
8. 转染过程中请不要使用抗生素。
9. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
10. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
版权所有:Mengbio| 联系电话:023-65333450 | 渝ICP备2021001939号-1 | 渝公网安备 50009802000855号
地址:重庆市沙坪坝区大学城东路20号(重庆科技学院纳微生物医学检测技术重庆市工程实验室)